Серологический метод исследования это

Серологические методы исследования в диагностике паразитарных заболеваний

Серологический анализ крови представляет собой способ лабораторного исследования определенных антигенов или антител (специфических белков) в сыворотке крови пациента, основанный на иммунных реакциях организма. Данный метод применяется при диагностике инфекционных заболеваний для выявления наличия антител в крови больного к определенному виду вирусов или бактерий, а также для определения групповой принадлежности крови.

Исследуемый материал

Методика проведения анализа или забора крови

Данный анализ не требует специальной подготовки пациента. Забор крови проводится утром натощак и, производится в процедурных кабинетах лечебных учреждений, согласно общепринятым гематологическим методикам. Для серологического исследования забор крови производится двумя методами: венозную кровь забирают из локтевой вены пациента, а капиллярную кровь – из безымянного пальца. Кровь помещают в стерильные герметичные пробирки.

Особенности транспортировки крови и хранения сыворотки

Для чего используют серологические исследования?

Серологические методы лабораторной диагностики используются для выявления таких заболеваний как эхинококкоз, трихинеллёз, токсокароз, описторхоз, цистицеркоз, токсоплазмоз, амебиаз, лямблиоз, для определения эффективности проведённого курса лечения и, наконец, для обнаружения повторного заболевания после полного выздоровления пациента.

Основные методы серологической диагностики

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Данная реакция является непрямым вариантом серологического исследования, то есть, производится она в два этапа. На первом этапе производят выявление необходимого антитела в циркулирующем комплексе антиген – антитело с помощью антиглобулина, схожего по своей структуре с белками иммунной сыворотки. Выявление искомого антитела возможно также при изучении заранее приготовленного антигенного препарата под люминесцентным микроскопом, без использования антиглобулинов.

Иммунофлюоресцентная реакция – очень трудоёмкий процесс, требующий от специалиста немало времени и ответственности. Начинается реакция с подготовки растворов, затем сыворотки и их контрольные образцы подвергаются титрованию (процесс, позволяющий определить содержание определённого вещества путём постепенного смешивания исследуемого раствора с контролируемым количеством реагента). Подготовленные ранее разведения и их контрольные образцы аккуратно наносятся на предметные стёкла с антигеном. Потом препараты подвергаются инкубации, затем следует их отмывание и высушивание на воздухе. На стёкла с антигеном тонким слоем наносится антисыворотка, после этого производится вторичная инкубация препаратов и, вся предыдущая цепь действий повторяется, завершаясь высушиванием препарата. В результате препарат на предметном стекле подвергается обработке глицерином и исследуется в люминесцентном микроскопе.

Результаты проведённой реакции оцениваются по четырёх бальной шкале, которая характеризуется интенсивностью поверхностного жёлто-зелёного свечения клеток антигенов:
+ очень слабое свечение клетки, заметное только на её периферии
++ слабое свечение периферии клетки, но с явно заметным зелёным оттенком
+++/++++ яркое свечение зелёного цвета периферии клетки
Титром реакции считается такое разведение сыворотки, где не менее 50 % клеток антигена проявляют чёткое поверхностное свечение, то есть результат реакции +++ или ++++. Значение тира реакции от 1/80 до 1/100.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)

Интенсивность реакции зависит от количества осаждённых эритроцитов на дне образованных лунок:
отрицательная реакция, которая характеризуется осаждением эритроцитов на дно лунок в виде небольшого колечка с гладкими краями или «пуговки»
+ слабая интенсивность, для данной реакции характерны небольшие одиночные отложения на дне лунки. Неагглютинированные эритроциты образовывают «маленькое колечко» в центре лунки
++ средняя интенсивность, ей свойственно образование на дне лунки «широкого плотного кольца» из неагглютинированных эритроцитов
+++ интенсивная реакция, агглютинированные эритроциты образуют так называемые «зонтики», в центре которых, явно видны кольца, образованные осевшими неагглютинированными эритроцитами
++++ резко интенсивная реакция, в которой агглютинируются все эритроциты и, образуя «зонтики», выстилают дно лунок.
Титром данной реакции считают последнее разведение сыворотки, при котором выявляется явная агглютинация эритроцитов не менее +++, то есть при интенсивной или резко интенсивной реакции.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Принцип метода заключается в своеобразном взаимодействии антитела с антигеном. Одним из обязательных условий реакции является предварительная фиксация одного из её компонентов, то есть антигена или антитела, на твёрдых планшетах. Затем, при помощи ферментной метки обнаруживают возникнувшие комплексы антиген – антитело благодаря изменению оптической плотности первоначальной смеси (субстрата), что проявляется изменением интенсивности её окраски. ИФА свойственны некоторые преимущества перед остальными серологическими методами, например, данная реакция является наиболее чувствительной, в тестах используются универсальные реагенты, остающиеся стабильными не менее 6 месяцев, автоматизированный процесс учёта результатов реакции. Набор, необходимый для проведения реакции, содержит следующие компоненты: паразитарный антиген, специфические сывороточные антитела, конъюгат, планшета с зафиксированным на ней специфическим паразитарным антигеном, контрольные сыворотки.

Постановка реакции ИФА происходит в несколько этапов: вначале производится приготовление необходимых растворов, затем готовятся исследуемые образцы сывороток, а также контрольные сыворотки, позже следует нанесение приготовленных образцов сыворотки и контрольных сывороток на твёрдофазные носители, планшеты инкубируются, промываются и, только после проведённых процедур в лунки планшет вносится конъюгат. Через некоторое время он удаляется путём промывания лунок. На завершающем этапе в лунки вносится субстратная смесь и выдерживается в тёмном месте при комнатной температуре. Оценка результатов проводится автоматически при помощи специальных измерительных приборов, в некоторых случаях допускается визуальный учёт результатов проведённой реакции.

Достоверность и качество методов серологической диагностики зависят от организации проведённого внутреннего и внешнего лабораторного контроля, состоящих из нескольких независимых процедур, предназначенных для оценки качества результатов проведённого анализа.

Серологические исследования

Что такое серологические исследования, для чего они проводятся, каковы основные методы серологической диагностики?

Серологические исследования — это методы изучения антигенов или антител в биологическом материале больных, основанные на определенных реакциях иммунитета. Обнаружение в биологическом материале антител к возбудителю инфекции или антигенов позволяет установить причину заболевания.

Серологические исследования не обладают 100% специфичностью и чувствительностью при диагностике инфекционных заболеваний. Поэтому оценивать их результаты нужно с учетом клинической картины заболевания. Этим обусловлена необходимость использования для диагностики инфекции нескольких тестов, а также применение методов Western-blot, подтверждающих результаты скрининговых методов.

«Иммуноблоттинг (Вестерн-блот, Western-blot) является фактически конечным верификационным (подтверждающим) методом в цепи иммунологических исследований, которые позволяют сделать окончательное лабораторное заключение. Особенно важный данный тест для подтверждения или опровержения инфекционного заболевания (например, коклющ, боррелиоз и т.д.). Метод Вестрен-блота, как правило, необходим после обнаружения положительных антител класса IgG инфекционного процесса, т.к. именно в такой комбинации происходит более правильная лабораторная интерпретация результатов и дальнейшая тактика лечения пациента. Для постановки Вестерн-блота используют специальные нитроцеллюлозные полоски, на которые методом горизонтального и затем вертикального иммунофореза перенесены белки в порядке нарастания молекулярного веса. Антитела сыворотки пациента взаимодействует с белками в определенных зонах полоски, а дальше происходит ход реакции аналогичный иммуноферметному анализу (ИФА)»,объясняет к.мед.наук, медицинский директор лаборатории СИНЭВО Украина, Оксана Владиславовна Небыльцова.

Биологический материал, используемый для серологического исследования
  • Сыворотка крови
  • Слюна
  • Фекальные массы
Для диагностики каких состояний используются серологические исследования

Целью серологических исследований является установление эффективности проведенного лечения после выздоровления пациента, а также обнаружение рецидива заболевания. Кроме того, серологические методы могут выявить такие заболевания как:

Основные методы, используемые в серологической диагностике
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ, метод Кунса)

Прямой: микробы или антигены тканей или микробы обрабатваются специальными сыворотками с антителами, а также меченными флюорохромами, которые светятся в УФ-лучах. Бактерии, таким образом, светятся в виде каймы зеленого цвета по периферии клетки. Наблюдается в люминисцентном микроскопе.

Непрямой: мазки обрабатываются антителами антимикробной кроличьей сыворотки. Затем антитела, которые не связались с антигенами микробов, отмываются. Таким образом, выявляются оставшиеся на микробах антитела. В итоге, образуется комплекс микроб + антикроличьи антитела + антимикробные кроличьи антитела, помеченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдается в люминесцентном микроскопе.

Для оценки результатов существует четырёхбалльная шкала, которая характеризуется интенсивностью поверхностного жёлто-зелёного свечения клеток антигенов:

+ очень слабое свечение клетки

++ слабое свечение периферии клетки

+++/++++ яркое свечение клетки

Титром реакции считается разведение сыворотки с результатом результат реакции +++ или ++++.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГ)

Реакция пассивной или непрямой гемагглютинации используется при диагностике инфекций, вызванных простейшими, бактериями и риккетсиями.

Методика состоит из нескольких этапов. Сначала эритроциты обрабатываются «отмываются» изотоническим раствором хлорида натрия, после, при необходимости, — раствором танина 1: 20000, далее сенсибилизируются растворимыми антигенами. После обработки буферным изотоническим раствором хлорида натрия, антиген готов к употреблению. Сыворотку разводят в пробирках изотоническим раствором хлорида натрия, после чего к каждой разведенной сыворотке добавляют эритроцитарный диагностикум.

Результаты оценивают по характеру осадка эритроцитов:

++++ резко интенсивная реакция

Положительным считается результат реакции с интенсивной реакцией +++ или резко интенсивной реакцией ++++, при которых эритроциты покрывают все дно пробирки.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Метод обладает высокой специфичностью и чувствительностью, более 90%. Основное достоинство — возможность выявления инфекции и прослеживания динамики процесса, на который указывает уровень антител.

Применяется анализ для диагностики широкого круга инфекций, в том числе:

  • ВИЧ-инфекция
  • Вирусные гепатиты
  • ЗППП
  • Цитомегаловирусная инфекция
  • Герпесная инфекция
  • Токсоплазменная инфекция

Результаты новых исследований, опубликованных в International Journal of Obesity, говорят, что пища, употребляемая на завтрак, программирует метаболизм человека на весь последующий день.

Антиген или антитело фиксируется на твёрдых планшетах, затем, с помощью ферментной метки выявляются комплексы антиген – антитело.

ИФА имеет ряд преимуществ перед остальными серологическими методами. Реакция наиболее чувствительная, а в тестах используются универсальные реагенты. Анализ отличается быстротой, возможностью исследования иммуноглобулинов различных классов. В настоящее время ИФА является одним из основных методов лабораторной диагностики.

Оценка результатов ИФА проводится автоматически с помощью специальных приборов. В некоторых случаях также допускается и визуальный учёт результатов реакции. Достоверность серологической диагностики зависит от организации лабораторного контроля, состоящего из нескольких процедур, предназначенных для оценки качества результатов.

Серологические методы исследования крови для диагностики заболеваний

Инфекционные болезни инициируют выработку в крови болеющего человека соответствующих антител. Так работает иммунная защита организма.

Определение наличия антител к конкретному вирусу или бактерии дает возможность узнать о наступлении заболевания до появления его основных симптомов. Сегодня серологическое и бактериологическое исследование дают наиболее полную картину. Поэтому мы и поговорим в данной статье об анализе на серологическое исследование.

Что такое серологические исследования

Методы изучения биологических материалов людей и животных, способные выявлять в них антитела или антигены, которые вырабатывает организм в виде защитной реакции в борьбе с инфекциями, называют серологические исследования. Такие методы применяют для определения возбудителя инфекции, а также с целью:

  • определения группы крови,
  • изучения иммунитета через определение уровня его гуморального звена,
  • определения тканевых антигенов.

Кому назначают серологическое исследование крови на паразитов, ВИЧ, сифилис, антитела, брюшной тиф, на маркеры инфекционных заболеваний, читайте ниже.

Кому его назначают

Исследования рекомендуют пациентам для установления диагноза при широком спектре инфекционных болезней. Проводят серологические исследования при определении группы крови, а также для выяснения эффективности лечения.

Зачем его делать

Метод ценится специалистами как способ сделать качественную диагностику заболевания.

  • Если больной находится в стадии заболевания, то повторные исследования рекомендуется проводить с интервалом примерно – неделя, чтобы наблюдать за эффективностью применяемого лечения.
  • Часто серологические исследования используют, чтобы определить, какой возбудитель вызвал болезнь уже после того, как пациент ее перенес.

Виды процедуры

Методы серологических исследований используют в своей основе различные реакции:

  • Реакция нейтрализации полагается на свойстве антител иммунной сыворотки действовать как нейтрализующее средство на токсины или сами микроорганизмы, предупреждая их повреждающее действие.
  • Реакция агглютинации, которая, в свою очередь, подразделяется на такие подвиды:
    • прямые реакции – их применяют при исследовании сыворотки крови на присутствие антител. В изучаемый состав вбрасывают убитые микробы и, если выпадает осадок в виде хлопьев, то значит, что на этот вид микробов реакция положительная;
    • реакция непрямой гемагглютинации производится введением в сыворотку крови эритроцитов, на которых адсорбированы антигены; эти агенты входят во взаимодействие с такого же рода антигенами, присутствующими в сыворотке крови, в результате этого выпадает фестончатый осадок.
  • Реакция с участием комплемента применяют для выявления инфекционных болезней. Метод реализуется через активацию комплемента и наблюдением за происходящими реакциями в исследуемой среде.
  • Реакция преципитации осуществляется наслоением раствора антигена на жидкую среду – иммунную сыворотку. Антиген для этого метода применяют растворимый. Реакция заключается в том, что комплекс антиген-антитело претерпевает осаждение; полученный осадок называют преципитатом.
  • Реакция с использованием меченых антигенов и антител основана на том, что микробы или антигены тканей, обработанные определенным образом, получают способность под действием ультрафиолетовых лучей излучать свет. Метод используют не только при диагностировании антигенов, но и для определения лекарственных веществ, ферментов, гормонов.

Противопоказания для проведения

В связи с тем, что метод заключается в изучении биологического материала пациента, он не может воздействовать негативно на человека. Поэтому противопоказаний к применению не имеется.

Как проводится серологическое исследование, расскажем ниже.

Показания для проведения

Метод применяют для определения возбудителя инфекции, в том числе при таких заболеваниях:

Также метод используют для выявления таких заболеваний:

  • описторхоз,
  • амебиаз,
  • цистицеркоз,
  • лямблиоз,
  • пневмония.

Подготовка к процедуре

Особых приготовлений к процедуре не требуется. Следует соблюдать одно условие: забор крови делается натощак.

Алгоритм забора (взятия) крови (материала) на серологическое исследование описан ниже.

Проведение анализа

Забор крови делают из локтевой вены. Для того чтобы исследование получилось, кровь набирают не шприцом, а самотеком. В вену вводят иглу без шприца и собирают в пробирку до 5 мл крови.

Во время процедуры пациент испытывает небольшой дискомфорт во время введения иглы в вену. Последующие действия совсем не вызывают беспокойства.

Расшифровка результатов серологического исследования крови описана ниже.

Расшифровка результатов

Полученные результаты следует рассматривать совместно с клинической картиной болезни, проверкой предполагаемого диагноза с использованием нескольких тестов. Это связано с тем, что исследования имеют специфичный характер и иногда не обладают абсолютной чувствительностью к инфекционным заболеваниям.

Цена на комплексное серологическое исследование крови описана ниже.

Средняя стоимость процедуры

Какая цена процедуры будет зависеть от вида исследования. Она состоит из стоимости произведения анализа и стоимости антител к определенному возбудителю болезни. Средняя стоимость процедуры в пределах 700 руб.

Серологические реакции описаны в видео ниже:

Серологические методы исследования

В организме человека происходит множество различных реакций, также ему приходится сталкиваться и с чужеродными объектами. В ответ на эти раздражители или антигены иммунная система человека дает адекватный иммунный ответ в виде антител. В лабораторной диагностике существует целый раздел или даже наука, изучающая иммунные реакции организма на чужеродные объекты – иммунология. Более узким направлением иммунологии является серология. Это наука о свойствах сыворотки (плазмы) крови.

Главной задачей серологии является изучение взаимодействия антигенов с антителами, содержащихся в сыворотке. Для выявления взаимодействия комплексов антител с антигенами используют различные реакции.

В медицинской практике серологические методы назначают для определения различных заболеваний. В первую очередь инфекционных, таких как сифилис, ВИЧ, хронические вирусные гепатиты и прочие. С помощью этих методов определяется группа крови человека. Также серологические методы используются в эпидемиологических мероприятиях для установления источника возбудителя каких-либо инфекций.

Методы являются эффективными и широко используются в лабораторной практике. Правда, встречаются и ложноположительные результаты, требующие дополнительных исследований.

Серологические реакции

К серологическим методам диагностики в первую очередь относят различные реакции. Они могут быть прямыми и косвенными. К прямым относят двухкомпонентные реакции: агглютинации, пассивной гемагглютинации и преципитации. Косвенные или трехкомпонентные включают реакции торможения или нейтрализации. Помимо реакций, существует метод иммунофлюоресценции и иммуноферментный анализ.

Реакция агглютинации

Под действием антител и изотонического раствора происходит склеивание и выпадение в осадок искомых клеток. Все реакции происходят в специальных микропланшетах, состоящих из лунок.

Реакцию прямой агглютинации проводят, например, при исследовании крови больного на брюшной тиф. Проводится реакция в виде добавления антигенов к сыворотке исследуемого, образующиеся комплексы выпадают в осадок.

При анализе на инфекционные заболевания чаще используют реакцию пассивной гемолитической агглютинации (РПГА). Суть метода заключается в том, что на внешней стенке эритроцитов имеются меченые антигены (возбудителя). На них прикрепляются антитела (белки) из сыворотки пациента, если таковые имеются.

Комплексы связываются и выпадают в осадок. Если на дне лунки выпадает плотное кольцо из эритроцитов, реакцию считают отрицательной, соответственно организм никогда не сталкивался с возбудителем. Если же осадок выпадает в виде «Зонтика», заполняя полностью всю лунку – результат положительный. Этот результат говорит о наличии в организме человека инфекционного заболевания.

Реакция торможения гемагглютинации основана на отсутствии агглютинации. То есть сыворотка способна нейтрализовать антигены вирусов. В результате они не могут прикрепляться к эритроцитам. Такую реакцию широко используют при исследовании вирусных заболеваний, чаще всего гриппа. Диагноз определяется по нарастанию титра антител больного.

Реакция преципитации

Принципом этого метода является склеивание комплекса «антиген-антитело» и выпадение его в осадок в виде преципитата (помутнения). При выполнении анализа этим методом антитела и антигены должны быть в равных концентрациях, в противном случае уровень образования комплекса значительно снижается.

Анализ проводится в пробирках, наслоением растворенного антигена на исследуемую сыворотку крови. В результате образуется кольцо (преципитат). Ширина кольца зависит от концентрации антигена. В настоящий момент чаще используется эта реакция в полужидком агаре или геле. В чашке Петре с агаром прорезаются лунки, в них закапываются антитела или антигены.

Различают два вида такой реакции:

  • простая иммунодиффузия – один компонент (антитело или антиген) размещаются в лунке, а другой смешиваются с агаром. В лунке с положительным результатом образуется мутное кольцо;
  • двойная иммунодиффузия – антитела и антигены размещаются по лункам. Реакция считается положительной при образовании между лунками мутной линии.

Реакция нейтрализации

Метод проведения основывается на специфике антител блокировать или разрушать действие токсинов или самих вирусов. Проводится эта реакции на культуре клеток. Если повреждения отсутствуют при смешении антител и вирусов, то можно говорить о взаимодействии комплекса «антиген-антитело».

Иммунофлюоресфентный анализ (РИФ)

Этот метод очень распространён в иммунологии при исследовании человека на сифилис. Суть метода остается та же – взаимодействие антител с антигенами. Только при этой реакции добавляется определенный реактив, помеченный красителем, который светится под действием ультрафиолетовых лучей.

Анализ проводится следующим образом. К исследуемой сыворотке добавляются меченые антитела. При положительной пробе образуются комплексы, которые отсматриваются с помощью флуоресцентной микроскопии.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Лабораторный анализ качественного или количественного определения различных соединений. В основе исследования лежит соединение комплекса антител и антигенов. Таким метод можно обнаружить протекание острого или хронического заболевания в организме человека.

Метод широко используется в медицине. В основном для скринингов, например, беременных на ВИЧ-инфекцию или краснуху.

Проводится анализ в микропланшетах. На их дне располагаются наслоенные антигены определяемого вируса. В каждую лунку добавляется сыворотка исследуемого и реактивы. Далее, планшет инкубируется, при этом и происходит реакции в виде изменения цвета. Затем с помощью ридера измеряется оптическая плотность каждой лунки. Чем она выше, тем выше концентрация возбудителя в организме человека.

Серология очень важна в лабораторной и медицинской практике. С помощью различных методов можно не только правильно диагностировать заболевание, но и предупредить его.

Cергеева Екатерина Андреевна

Страничка оказалась полезной? Поделитесь ею в своей любимой соцсети!

Зачем делают серологический анализ крови

Для выявления большинства заболеваний требуется сдавать различные анализы крови, которые помогут определить не только наличие опасной патологии, но и установить эффективность лечения. Серологический анализ крови – распространенный метод лабораторного исследования, который позволит определить, есть ли вирусы, инфекции и микробы в организме человека. Данное обследование способно выявить заболевания, возникающие при ослаблении в организме защитных реакций, оно поможет установить наличие даже такого опасного заболевания, как ВИЧ.

Что такое серологический анализ

Серологией называют в медицине раздел науки иммунологии, который изучает реакцию антигенов на антитела. Данная отрасль медицины изучает плазму крови, а также ее иммунологические возможности. Анализ крови на серологические реакции определяет наличие и поведение особых антител, которые человеческий организм вырабатывает для борьбы с различными инфекциями и вирусами. Он с большой долей вероятности установит заболевание и определит успешность лечения.

Откуда берутся антитела и для чего они нужны? Организм человека постоянно подвергается проникновению различных вирусов и инфекций. Для борьбы с ними наша иммунная система и вырабатывает специальные антитела, которые связывают инфекционные антигены и подавляют их деятельность. Серологический анализ крови сообщит о состоянии иммунной системы человека, укажет на наличие инфекционно-вирусных заболеваний в настоящем времени или тех, от которых организм уже избавился.

Серологический анализ крови, в отличие от общего химического анализа крови, сдать необходимо при подозрении на какое-либо вирусное или инфекционное заболевание. Данное исследование установит точного возбудителя заболевания, в случаях, когда трудно поставить правильный диагноз. Если возбудитель выявлен верно, можно назначить максимально эффективное лечение.

В каких случаях назначают проведение этого исследования? Если нужно определить колличество антител, воздействующих на вирус или инфекцию, провоцирующих заболевание. Для этого в плазму крови вводится антиген возбудителя, после чего изучаются результаты процесса.

Возможно проведение противоположного процесса: наличие инфекции выявляют, добавляя в плазму крови антитела, что позволяет определить наличие антигенов и их принадлежность к конкретному микроорганизму.

Также с помощью проведения данного исследования определяют группу крови человека.

Анализ крови – серологические исследования необходимо проводить при подозрении на инфекционные половые заболевания, а также для постановки диагноза при подозрении венерических болезней.

Расшифровка данного анализа предоставит информацию о наличии в плазме крови антител к конкретной группе опасных микроорганизмов. У тех, кому назначено это исследование, может возникнуть вопрос, серологический анализ крови что показывает, какие именно заболевания можно определить с его помощью? Список заболеваний, диагностика которых должна осуществляться серологическим методом, на самом деле немаленький. Исследование выявит такие заболевания, как герпес, краснуха, сифилис, гепатит, токсоплазмоз, корь, брюшной тиф, лямблиоз, коклюш, и т.д.

Более того, исследование поможет выявить аутоиммунные заболевания и определит не только группу крови, но и резус-фактор. Его также проводят для подтверждения отцовства и определения природы и источника инфекции при эпидемиях. Данный тест обязательно проводят беременной женщине для обследования на предмет наличия опасных для плода заболеваний, таких как токсоплазмоз, сифилис, краснуха и т.д.

Как сдавать серологический анализ крови

Серологический анализ крови на сифилис, на паразитов, брюшной тиф и другие заболевания можно сдают, осуществляя забор крови из локтевой вены. Исследование безопасно для человека и не требует от пациента соблюдения сложных правил. Главное, что нужно сделать перед процедурой – соблюдать небольшую диету в течение нескольких дней. Сам тест проводится натощак, а накануне ужин должен быть максимально легким. Не стоит перед исследованием пить кофе, чай, употреблять спиртные напитки. Лучше отказаться от применения каких-либо лекарств, но нужно это сделать только при согласовании с врачом. За сутки до проведения теста необходимо исключить из рациона фрукты и овощи. Если не соблюсти данные правила, результат серологического анализа может оказаться неверным. В любом случае, независимо от результатов, исследование проводится два раза.

Особенности проведения серологического теста

Забор крови для серологического исследования производится только через несколько недель после предполагаемого инфицирования. Если попробовать обследование провести сразу, оно даст ложные результаты. Подтверждение инфицирования можно получить только через полтора месяца после атаки.

Еще одна особенность данного метода, это вероятность ложного положительного результата в некоторых случаях. Например, при беременности можно получить ложный положительный результат на гепатит. Иногда исследование может выявить наличие ВИЧ-инфекции, в то время, как на самом деле организм такому заболеванию не подвержен. Положительный результат, полученный при первичном анализе – не истина в последней инстанции. Как правило, практически всегда для точной постановки диагноза исследование проводится повторно.

Расшифровка результатов исследования

После забора крови и проведения исследования, специалист сначала выявляет в организме человека наличие инфекционного или вирусного заболевания, а затем, исходя из колличества антител, определяет степень развития заболевания. Если проведен серологический анализ крови, расшифровка которого показывает нулевое содержание антител, значит, организм не инфицирован. Но если содержание антител немного превышено, вероятнее всего, вирусное или инфекционное заболевание имеет место быть. Но помним, что необходимо проведение повторного анализа.

Серологические методы исследования;

Особенности иммунитета при протозойных заболеваниях

Особенности иммунитета при грибковых заболеваниях

Особенности противогрибкового иммунитета зависят от морфологических свойств грибков (размеры клеток, форма), сложности их антигенного состава, изменчивости в зависимости от условий существования, формы и стадии микоза.

Большинство грибков относятся к свободноживущим организмам и только некоторые из них способны вызывать заболевания. Более того, для возникновения заболевания у человека необходимым условием является наличие у него иммунодефицита по полиморфноядерным лейкоцитам, Т-лимфоцитам, С3 компоненту комплемента. Функциональными дефектами лейкоцитов является их неспособность образовывать псевдоподии (синдром «ленивых лейкоцитов»), неспособность формировать фаголизосомы (синдром Чедиака-Хигаси), нарушение способности к продукции активных форм кислорода, обеспечивающих переваривание микроба. Дефицит по С3 также ведет к снижению активности фагоцитов. И, наконец, наиболее часто микозы у человека возникают при низкой продукции Т-лимфоцитов (Тс, Тh).

Формирование иммунитета связывают с восстановлением функциональной активности полиморфно-ядерных лейкоцитов и усиленной продукцией Т-лимфоцитов.

Специфические антитела образуются лишь при некоторых формах глубоких микозов. Считают, что они не принимают участия в механизмах защиты, являясь свидетелями иммунной перестройки организма.

Особенности обусловлены внутриклеточной локализацией возбудителей, изменчивостью их поверхностных антигенов, наличием антигенов, общих с антигенами клеток человека, иммуносупрессивными свойствами паразитов.

При протозойных заболеваниях могут образовываться IgМ и IgG, но специфичность их крайне низка вследствие их образования в результате поликлональной активации В-лимфоцитов и антигенной изменчивости паразитов.

Выздоровление наступает при активации Т-лимфоцитов (Тс, Тh). Полноценный постинфекционный иммунитет формируется очень редко.

Серологические реакции применяют в двух направлениях:

1. Выявление с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого при наличии набора известных антигенов. В качестве антигенов применяют взвеси микроорганизмов, инактивированные химическими или физическими методами, или используют диагностикумы, представляющие фракции микроорганизма.

Как правило, результаты серологической диагностики получают при исследовании парных сывороток крови больных, взятых в первые дни болезни и через определенные промежутки времени от начала заболевания.

2. Определение родовой, видовой и типовой принадлежности микроорганизма или его антигенов с известными иммунными сыворотками. Иммунные сыворотки должны содержать антитела в высоком титре и быть строго специфичными.

В лабораторной практике применяют серологические реакции, основанные на прямом взаимодействии антигена с антителом (агглютинация, преципитация) и опосредованные реакции (реакция непрямой гемагглютинации, реакция связывания комплемента), а также реакции с использованием меченых антител или антигенов (иммуноферментный, радиоиммунный анализ, метод флюоресцирующих антител).

Реакция агглютинации (РА)

Реакция агглютинации применяется в лабораторной практике для идентификации выделенных микроорганизмов или для обнаружения специфических антител в сыворотке крови.

Механизм реакции основан на взаимодействии детерминантных групп антигена с активными центрами иммуноглобулина в электролитной среде. Реакции протекают в две фазы – соединение антигена с антителом, вторая фаза – выделение в осадок образовавшегося комплекса АГ+АТ. Характер осадка зависит от природы антигена: жгутиковые бактерии дают крупнохлопьевый осадок, безжгутиковые и бескапсулярные – мелкозернистый, капсульные – тяжистый (рис. 41).

Существуют два способа постановки реакции агглютинации: 1) пластинчатый и 2) пробирочный. Пластинчатый метод является качественной реакцией и служит для предварительного определения вида микроба. Пробирочный метод используется для определения количественного содержания антител, при этом в пробирках ставится развернутая реакция агглютинации.

При положительной реакции на дне пробирки образуется осадок (агглютинат). За титр антител принимают последнее разведение, в котором наблюдается четкая агглютинация. Интенсивность оценивается по 4-х крестной системе. Постановка РА должна сопровождаться контролем сыворотки и антигена. Учет реакции агглютинации на стекле производится через 5 – 10 мин, пробирочной – через 18 – 20 часов.

Реакция преципитации (РП)

Феномен преципитации заключается во взаимодействии мелкодисперсных антигенов (преципитиногенов) с соответствующими антителами (преципитинами) и образованием преципитата (рис. 42). Постановку РП осуществляют двумя методами: в жидкой среде – по типу реакции флокуляции, кольцепреципитации или в плотной среде в агаре (геле). РП применяют в двух целях: выявление антигенов по известной иммунной преципитирующей сыворотке или антител с использованием известных антигенов. Существует много вариантов постановок реакции, но чаще всего используют следующие методики: реакция преципитации в геле по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия по Манчини, реакция иммуноэлектрофореза, реакция флокуляции, кольцепреципитации.

Реакция преципитации в геле по Оухтерлони. Для постановки реакции используют 1% агар Дифко, который разливают расплавленным на предметные стекла или чашки Петри слоем толщиной 0,5 см. В застывшем агаре вырезают лунки диаметром 5 мм специальным приспособлением. В одну лунку помещают взвесь, содержащую исследуемый антиген, в другую – иммунную сыворотку. Антиген и антитела диффундируют в питательную среду, вступают в иммунную реакцию и образуют полосы преципитации. Учет реакции проводят предварительно через 4 часа, окончательно – через 24–48 часов. Реакцию Оухтерлони можно использовать для определения токсичности бактерий, титра антител, активности стандартных диагностикумов или иммунных специфических сывороток (рис. 43).

Понравилась статья? Поделиться с друзьями: